2013年6月27日 星期四

第一天 — 學挑單孢

我們這屆真菌學實習沒有學怎麼拉玻璃針跟怎麼挑單孢。

今天是第一次用玻璃針挑單孢。

這次是學姊讓我用Fusarium sp. strain 1132作為材料,
用實驗室已經拉好的玻璃針拉出單孢。

首先,將於PDA培養基培養的Fusarium sp. strain 1132,
(Fusarium sp.的孢子真的好小哦!!)
用解剖刀切出的CM(?)培養基塊,沾取1132的孢子。
(解剖刀沾95%酒精,過火滅菌,於agar上冷卻即可使用)

沾於新一皿的CM(?)培養基,大約於同一直線上沾出三~四個孢子堆

接著,用玻璃針將孢子堆垂直向下拉畫
(挑選適合硬度彈性的玻璃針,盡量不要刺破agar,
畫的角度盡量不要跟手移動的方向差太多 ps.用掃的掃到agar的雜質,
孢子就會被彈走)
會發現可以拉出一條直線排列的分生孢子。

此時可以找尋與其他分生孢子距離較遠的作為目標單孢。
若無,可以用玻璃針在一直線孢子之垂直方向再把孢子距離挑遠。

凡找到單孢,可以利用解剖刀以單孢為中央,在其左右兩側切個記號。

最後完成了大概四個比較滿意的,可惜距離有點近,
學姊說,孢子發芽後長很快,會互相接觸、蓋到。
ps. Fusarium spp.變異很快

希望明天來得及移到不受其他孢子發芽影響的發芽單孢。
於是乎,我中午下課就要趕緊去移菌了!
只好請別人幫我買個午餐,
這樣下午的課才不會來不及囉!

挑單孢,這是一個耗眼力跟手不抖的工作,
玻璃針好不好用影響也很大,不過這次還沒有時間自己拉拉看玻璃針。
光挑單孢,練習就花了兩個小時呢!
學姐也說,會不會刺破agar除了技巧之外,也跟agar玻璃針有關。
有事沒事,我應該都來練練挑單孢的技術,希望可以越來越熟練,
這樣在挑計畫的菌株單孢可以趕快上手。

之後的工作就是,
將1132移到PDA培養基培養,
成功發芽了幾個單孢,就移幾皿。
之後就等星期一下午下課再去一趟了。

加油!! 挑單孢再接再厲啊!! 羅馬不是一天造成的....










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