我們這屆真菌學實習沒有學怎麼拉玻璃針跟怎麼挑單孢。
今天是第一次用玻璃針挑單孢。
這次是學姊讓我用Fusarium sp. strain 1132作為材料,
用實驗室已經拉好的玻璃針拉出單孢。
首先,將於PDA培養基培養的Fusarium sp. strain 1132,
(Fusarium sp.的孢子真的好小哦!!)
用解剖刀切出的CM(?)培養基塊,沾取1132的孢子。
(解剖刀沾95%酒精,過火滅菌,於agar上冷卻即可使用)
沾於新一皿的CM(?)培養基,大約於同一直線上沾出三~四個孢子堆。
接著,用玻璃針將孢子堆垂直向下拉畫,
(挑選適合硬度彈性的玻璃針,盡量不要刺破agar,
畫的角度盡量不要跟手移動的方向差太多 ps.用掃的掃到agar的雜質,
孢子就會被彈走)
會發現可以拉出一條直線排列的分生孢子。
此時可以找尋與其他分生孢子距離較遠的作為目標單孢。
若無,可以用玻璃針在一直線孢子之垂直方向再把孢子距離挑遠。
凡找到單孢,可以利用解剖刀以單孢為中央,在其左右兩側切個記號。
最後完成了大概四個比較滿意的,可惜距離有點近,
學姊說,孢子發芽後長很快,會互相接觸、蓋到。
ps. Fusarium spp.變異很快。
希望明天來得及移到不受其他孢子發芽影響的發芽單孢。
於是乎,我中午下課就要趕緊去移菌了!
只好請別人幫我買個午餐,
這樣下午的課才不會來不及囉!
挑單孢,這是一個耗眼力跟手不抖的工作,
玻璃針好不好用影響也很大,不過這次還沒有時間自己拉拉看玻璃針。
光挑單孢,練習就花了兩個小時呢!
學姐也說,會不會刺破agar除了技巧之外,也跟agar和玻璃針有關。
有事沒事,我應該都來練練挑單孢的技術,希望可以越來越熟練,
這樣在挑計畫的菌株單孢可以趕快上手。
之後的工作就是,
將1132移到PDA培養基培養,
成功發芽了幾個單孢,就移幾皿。
之後就等星期一下午下課再去一趟了。
加油!! 挑單孢再接再厲啊!! 羅馬不是一天造成的....
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